题目内容
【题目】镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子β一肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常。回答下列问题：
（1）该病___________（填“可以”或“不可以”）通过显微镜观察检测。
（2）从正常人的早期红细胞中提取β________为模板，在β________酶的作用下反转录合成cDNA。再以________的方法，对所得的cDNA进行检测，筛选出血红蛋白基因。
（3）将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，再将导入成功的造血干细胞重新输人患者体内可以成功治疗该病，该治疗过程属于________（填“体内”或“体外”） 基因治疗。此操作________（填“属于”或“不属于”）蛋白质工程，理由是该操作________。
【答案】可以??? mRNA??? 逆转录??? DNA分子杂交（基因检测）??? 体外??? 不属于??? 没有对现有的蛋白质进行改造（或没有对基因进行修饰）???
【解析】
1.基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白用抗原―抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2.蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
（1）镰刀型细胞贫血症患者的红细胞由圆饼型变成了镰刀型，所以该病可以通过显微镜观察检测。
（2）从正常人的早期红细胞中提取mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下反转录合成cDNA，再以DNA分子杂交的方法，对所得的cDNA进行检测，筛选出血红蛋白基因。
（3）将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，再将导入成功的造血干细胞重新输入患者体内，可以合成正常血红蛋白达到治疗目的,该治疗过程属于体外基因治疗。该过程中由于没有对现有蛋白质进行改造，也没有对基因进行修饰，因此不属于蛋白质工程。
