Question

[选做―现代生物科技专题]（14分）：下图是将人的生长素基因导入细菌B细胞内培育“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A，已知细菌B细胞内不含质粒A及其上面的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因得到表达。请回答：

            

（1）基因工程的操作程序主要包括四个步骤是             、基因表达载体的构建、                和目的基因的检测。

（2）获取目的基因的方法，一是______________________________________________；

二是_______________________________________________。

（3）如何使目的基因和质粒结合形成重组质粒？_______________              。

（4）目前把重组质粒导入细菌时，效率还不高，有的只导入普通质粒A，只有极少数导入的是重组质粒，而大部分根本没有导入质粒。此处可通过如下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含四环素培养基上，能够生长的就导入了，反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是____________________。

（5）若把已导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含氨苄青霉素的培养基上培养，将会发生________      　　　　　　　　　　　　现象。

 

Answer 1

（1）目的基因的获取  将目的基因导入受体细胞

（2）从供体细胞的DNA中直接分离基因  人工合成基因

（3）先用一种限制性内切酶切割目的基因和质粒，露出相对应的黏性末端，再用DNA连接，酶使两者的黏性末端结合

（4）普通质粒A和重组质粒都含有四环素抗性基因

（5）有的能生长，有的不能生长（ 导入普通质粒A的细菌能生长，因其有抗氨苄青霉素的基因；导入重组质粒的细菌不能生长）