我国首例绿色荧光蛋白“转基因克隆猪.其中2头在转基因性状上.明显表达出绿色荧光蛋白的特征.在紫外光源激发下其口.蹄及舌头可以观察到明显的绿色荧光.此次绿色荧光蛋白“转基因克隆猪的试验成功.意味着我国体细胞在下列哪项技术已趋于成熟.这标志着我国在转基因克隆猪技术研究领域已经步入世界先进水平行列.克隆猪采用的技术有 A．细胞核移植 B．题目和参考答案——青夏教育精英家教网——

题目内容

我国首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪。其中2头在转基因性状上，明显表达出绿色荧光蛋白的特征，在紫外光源激发下其口、蹄及舌头可以观察到明显的绿色荧光。此次绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪的试验成功，意味着我国体细胞在下列哪项技术已趋于成熟，这标志着我国在转基因克隆猪技术研究领域已经步入世界先进水平行列。克隆猪采用的技术有（）

A．细胞核移植 B．细胞融合 C．蛋白质工程 D．单克隆抗体

A

解析:

本题考查的是体细胞克隆技术和基因工程的应用。转基因的意思就是基因的转移，基因组中导入外源基因，并且能够表达，即＂绿色荧光＂，动物体细胞克隆是将供体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。

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（共12分）下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。

请据图回答下列问题：

(1)上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其核心步骤是______________________ 。

（2）构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）,b箭头指的的是，PCR过程断裂此键用。

(3)若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。

(4)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________激素处理成年母猪。

(5)H过程的名称是______ ___，所选择的胚胎一般处于_______ 期较合适。

(6)经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型______ (相同/不相同)的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行___________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。

下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。

请据图回答下列问题：

(1)上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其核心步骤是_______________。

(2)若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。

(3)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________激素处理成年母猪。

(4)H过程的名称是______ ___，所选择的胚胎一般处于_______ 期较合适。

(5)经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型______ (相同/不相同)的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行___________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来，理由是：。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：（用数字表示）。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）

④表达出蓝色荧光蛋白。

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：__________________________________________________。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________________。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

（5）若要在体外扩增绿色荧光蛋白基因可采用PCR技术。标准的PCR过程分为三个步骤，第一步是“变性”,这一步骤如果发生在细胞内，是在的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到酶。

(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________________等。(至少答出三项)

分析回答有关生物工程中的问题：（8分）

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________

_________。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______ ___ 。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。