题目内容

【题目】动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。现在己经广泛应用于多种学科的研究:新发展起来的杂交瘤技术,为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径:“S途径”和“D途径”,淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”;骨髓瘤细胞只有“D途径”;HAT培养液中氨基喋呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题:

___________技术是单克隆抗体技术的基础。

⑵单克隆细胞是指__________________________________________________

⑶单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是____________

⑷杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_____________特点,又具备淋巴细胞的__________特点。

⑸图示过程,有两次的筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞,那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_________,骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_______

【答案】1)细胞培养技术、细胞融合技术 (2)单个细胞增殖,形成的细胞群

3)特异性强,灵敏度高 (4)在体外大量增殖(无限增殖) 分泌特异性抗体

5)缺乏在体外培养液中增殖的能力 其DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制

【解析】1)细胞培养技术、细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础。

2)单克隆细胞是指单个细胞增殖,形成的细胞群。

3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是特异性强,灵敏度高,可大量制备。

4)杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的在体外大量增殖(无限增殖)的特点,又具备淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点。

5)图示过程中有两次的筛选,第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞,那么淋巴细胞(效应B细胞)在HAT培养液中不生长的原因是缺乏在体外培养液中增殖的能力;骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是其DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制。

项目

第一次筛选

第二次筛选

筛选原因

诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞

由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞

筛选方法

用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、瘤瘤细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B细胞)才能生长

用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群

筛选目的

得到杂交瘤细胞

得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞

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