题目内容
(18分)白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中,使其分泌出有活性人白细胞介素。
(1)在体液免疫过程中,白细胞介素是由___细胞分泌的,可作用于受到抗原刺激的B细胞,使B细胞增殖,分化、形成____________细胞。
(2)目的基因获取:从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞,于37°C培养48h,提取细胞总RNA,生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列,合成引物、通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是______________________________ 。
(3)重组载体的构建:用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后,用_______________酶处理,形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是______和______。
(4)将重组载体导入酵母细胞,在培养液中培养一段时间后,收集菌液离心取______(上清液/菌体)进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目,常用的方法是_________。
(5)利用纯化的产物进行细胞培养实验,可研究人白细胞介素对于____________ 的作用。
【答案】
(每空2分,共18分)
(1)T;浆细胞和记忆;
(2)模板eDNA、耐高温(热稳定)DNA聚合酶(Taq酶)、引物;
(3)DNA连接;DNA;蛋白质;
(4)上清液;稀释涂布平板法;
(5)促进淋巴细胞增殖(抑制肿瘤细胞增殖)。
【解析】
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