Question

【题目】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，操作流程如下：采集样品→富集培养→分离、纯化培养→筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌→保存备用。

（1）从用途上来说，富集培养基属于________培养基；进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的________。之后用______法接种，若该过程所得平板上的平均菌落数为50个，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的细菌数为______个。

（2）培养基配置和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是________；实验室中常使用________（设备）对培养基灭菌。

（3）若菌落的大小大致相同，菌落发生的时间也相同，__________（填“能”或“不能”）仅根据菌落周围透明圈的大小来判断该菌落所产生的淀粉酶单位酶量酶活力的高低，理由是____________。

Answer 1

【答案】选择 琼脂 稀释涂布平板 5×107 先调节pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌锅 不能 透明圈的大小可能是不同菌落产生的酶量不同导致（或酶活力相同时，酶量越大，透明圈就越大

【解析】

1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

（1）该实验的目的是筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。按功能分，题目中的富集培养基为选择培养基，该培养基需以淀粉为唯一的碳源。进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。此时所使用的培养基为固体培养基，其中添加了一定量的琼脂。从液体菌种到固体平板的过程及菌落生长均匀可推知，过程①②为稀释涂布平板法。每毫升样品中的细菌数约为50÷0.1×105=5×107个。

（2）培养基配置和灭菌时，培养基在灭菌前先进行调节pH值，对培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌处理。

（3）酶活力相同时，酶量越大，透明圈就越大，透明圈的大小可能由不同菌落产生的酶量不同导致，因此若菌落的大小大致相同，菌落发生的时间也相同，不能仅根据菌落周围透明的大小来判断该菌落所产生的淀粉酶单位酶量酶活力的高低。