Question

【题目】小鼠的某种抗体由轻链和重链组成，科学家将编码轻链和重链的基因分别导入两个不同的烟草植物体内，然后让两株植物进行杂交就能获得可同时编码轻链和重链两种多肽的植株，即合成小鼠抗体的转基因植物。回答下列问题：

（1）若要获取小鼠的编码轻链和重链的基因，可以先提取小鼠浆细胞中编码两条链的mRNA，然后通过

过程获取小鼠的cDNA，并利用 技术对目的基因进行扩增。

（2）在构建基因表达载体时，需要用到的工具酶有 ，基因表达载体中的目的基因两端的序列分别是 和 。

（3）用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，常常将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的

上。检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，一般用标记的 作探针。

（4）若想大规模培育能合成小鼠抗体的转基因植物，可采用 技术。

Answer 1

【答案】

（1）逆转录（2分） PCR（2分）

（2）限制酶和DNA连接酶（1分） 启动子（2分） 终止子（2分）

（3）T—DNA （2分） 目的基因（2分）

（4）植物培养（2分）

【解析】

（1）由mRNA获得cDNA的过程是逆转录，在体外进行扩增DNA用PCR技术，故是逆转录和PCR。

（2）构建基因表达载体需要用限制酶和DNA连接酶，基因表达载体中至少应有启动子、终止子、目的基因和标记基因，而启动子位于前面，终止子位于后面。

（3）农杆菌转化法是利用农杆菌Ti质粒上的T-DNA具有转移DNA的特性，所以应将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上。检测基因是否导入到受体细胞可以用DNA分子杂交技术，此时的探针是用标记的目的基因。

（4）要大规模培养转基因植物可以用植物组织培养技术。

生物种类	植物	动物	微生物
常用方法	农杆菌转化法	显微注射技术	感受态细胞法
受体细胞	体细胞或受精卵	受精卵	原核细胞
转化过程	将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达	将含有目的基因的表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物	Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子