题目内容
【题目】严重联合性免疫缺陷症是一种T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶（ADA）引起的疾病，通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中进行治疗。图分别表示正常ADA基因、金属硫蛋白基因（含有该基因的细胞能在含重金属镉的培养基中生长）和质粒（总长为3.8kb，lkb=1000对碱基），ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ均为限制酶。
（1）基因工程的理论依据是不同生物_____________(多选）。
A．细胞结构相同 B．DNA双螺旋结构相同
C．都遵循中心法则 D．共用一套密码子
（2）为了筛选含有目的基因的受体细胞，需要先将目的基因和标记基因连接形成融合基因。首先用__________________________限制酶切割正常腺苷脱氨酶基因与金属硫蛋白基因，然后用DNA连接酶将它们连接形成融合基因。
（3）将上述融合基因与图17中的质粒构建成重组质粒时，应选用的限制酶是_______。
A．ClaⅠ B．SacⅠ和XbaⅠ
C．ClaⅠ和XbaⅠ D．ClaⅠ和SacⅠ
（4）若该融合基因长1.9kb，据图分析，此重组质粒大小为__________kb。
（5）重组质粒应导入的受体细胞是病人的T淋巴细胞。若上述基因工程的受体细胞为微生物，目的基因也可以表达成功。请结合题意阐述目的基因可以在微生物等受体细胞中得以表达的原因：_______________________________。
【答案】BCD ClaⅠ、XbaⅠ和 SacⅠ B 5.3 不同生物的DNA分子的结构相同，都具有独特的双螺旋结构，可以相互连接起来；不同的生物DNA复制、转录和翻译过程中都遵循碱基互补配对原则，且翻译过程中共用一套遗传密码，因此目的基因在受体细胞可以表达出相应的蛋白质
【解析】
1、限制性核酸内切酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
2、DNA连接酶将两个双链DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
3、基因工程的基本操作流程：获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→得到转基因生物→目的基因检测与鉴定
（1）从分子水平分析，不同生物的DNA分子的结构相同，都具有独特的双螺旋结构，可以相互连接起来；不同生物的基因指导蛋白质的合成过程均遵循中心法则，且翻译过程中共用一套遗传密码。综上所述，A错误，B、C、D正确。故选BCD。
（2）由题意可知，可用ClaⅠ和SacⅠ限制酶切割正常腺苷脱氨酶基因，用ClaⅠ和XbaⅠ限制酶切割金属硫蛋白基因，然后用DNA连接酶将它们连接形成融合基因。
（3）由题意可知，融合基因两端是SacⅠ和XbaⅠ限制酶切割的黏性末端，与图17中的质粒构建成重组质粒时，应选用的限制酶是SacⅠ和XbaⅠ切割质粒，B正确，A、C、D错误。故选B。
（4）若该融合基因长1.9kb，据图分析，用SacⅠ和XbaⅠ限制酶切割质粒后的形成长0.4kb和3.4kb的碱基片段，融合基因与酶切后的质粒（大小为3.4kb）构建成重组质粒，其大小为5.3kb。
（5）目的基因可以在微生物等受体细胞中得以表达的原因：不同生物的DNA分子的结构相同，都具有独特的双螺旋结构，可以相互连接起来；不同的生物DNA复制、转录和翻译过程中都遵循碱基互补配对原则，且翻译过程中共用一套遗传密码，因此目的基因在受体细胞可以表达出相应的蛋白质
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