题目内容
根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别培养基，结合显微镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。
⑴用无氮培养基可以筛选出 。
⑵用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出 。
⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入 。
⑷用加入了较高浓度的NaCl的选择培养基可以筛选出 ，或者根据菌落的颜色呈现 色，将其挑取单独培养。
⑸利用伊红－美蓝培养基培养混合菌，菌落呈 色，并带有金属光泽的是 ，挑取单个菌落培养。结合显微镜检和进一步用伊红－美蓝培养基鉴别来确定。
⑹在无氧条件下培养混合菌， 可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制 菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出 。
⑴圆褐固氮菌 ⑵硝化细菌 ⑶青霉素 ⑷金黄色葡萄球菌 金黄 ⑸深紫 大肠杆菌 ⑹乳酸菌和酵母菌 酵母 乳酸菌
【解析】
试题分析：本题考查利用选择培养基分离筛选微生物。
⑴用无氮培养基可以筛选出圆褐固氮菌，因为圆褐固氮菌可以自生固氮，不需要氮源。
⑵用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出硝化细菌，因为硝化细菌是化能自养型生物，不需要碳源。
⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入青霉素，因为青霉素仅对细菌起作用，对酵母补齐作用。其实最好是氨苄青霉素，大肠杆菌等革兰氏阴性菌对青霉素不敏感。
⑷用加入了较高浓度的NaCl的选择培养基可以筛选出金黄色葡萄球菌，或者根据菌落的颜色呈现金黄色，将其挑取单独培养，因为金黄色葡萄球菌耐高盐。
⑸利用伊红－美蓝培养基培养混合菌，菌落呈深紫色，并带有金属光泽的是大肠杆菌，挑取单个菌落培养。结合显微镜检和进一步用伊红－美蓝培养基鉴别来确定。
因为伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。
⑹在无氧条件下培养混合菌，乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌。因为大肠杆菌很耐酸的。
考点：选择性培养基筛选大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌。
点评：本题综合性强，突出理解、分析和推理能力的培养。
