Question

【题目】土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培养基过程中的某操作，图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

请回答下列问题：

（1）图1所示操作称为_________，待平板冷凝后_________，以防止________。

（2）图2所示接种方法是________。在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是38、42、40，则1g土壤中的活菌数约为________个。

（3）图3是某同学利用不同于图2方法分离菌株Q的示意图。下列对其操作及结果的叙述错误的有________。

a．操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理 b．划线时将沾有菌种的接种环插入培养基

c．只有在⑤区域中才能得到所需菌落 d．整个过程需要对接种环进行6次灼烧

（4）固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（图4），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

菌株	透明圈直径（D）	菌落直径（d）
M-3-01	18.8	12.3
B3-5-6	20.7	8.0
T-4-01	9.1	6.5

根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是________。该菌种分离纯化后，常用________法进行长期保存。

Answer 1

【答案】倒平板 倒置 皿盖上的冷凝水落入培养基 稀释涂布平板法 a、b、c B3-5-6 甘油管藏

【解析】

分析题意可知，“透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格可知，菌株B3-5-6的比值（D/d）最大，说明菌株B3-5-6的溶解磷的能力最大。

（1）图1所示操作称为倒平板，待平板冷凝后倒置，以防止皿盖上的冷凝水落入培养基，带来污染。

（2）图2所示接种方法是稀释涂布平板法。取1g土壤，按如图稀释后，在三个平板上分别接入0.1ml稀释液后，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是38、42、40，据此可计算出每克土样中的活菌数为（38+42+40）/3×10×10×10×（1/0.1）×100=4.0×107个。

（3）图3是通过平板划线接种操作。

a、操作前用70%的酒精溶液对接种人员的双手进行消毒处理，不能进行灭菌处理，a错误；
b、划线操作时将沾有菌种的接种环涂抹在培养基表面，b错误；
c、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，c错误；
d、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，整个过程需要对接种环进行6次灼烧，d正确。
故选abc。

（4）根据实验原理中“透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格数据可以确定解磷能力最强的菌株是 B3-5-6。该菌种分离纯化后，常用甘油管藏法进行长期保存。