题目内容
【题目】如图显示了人体内部分物质的代谢途径，字母代表物质，数字代表反应过程。下列叙述错误的是
A.过程①和过程②分别发生在细胞质基质和线粒体中
B.过程②过程③都有水的生成
C.物质X产生物质Y的同时也会产生大量[H]
D.过程③发生在细胞质中
【答案】C
【解析】
分析题图可知，①为有氧呼吸或无氧呼吸的第一阶段，②为有氧呼吸的第二、三阶段，③为氨基酸脱水缩合，X为葡萄糖，Y为丙酮酸。
A、①为有氧呼吸或无氧呼吸的第一阶段，在细胞质基质中，②为有氧呼吸的第二、三阶段，在线粒体中，A正确；
B、②为有氧呼吸的第二阶段和③为氨基酸脱水缩合，都有水生成，B正确；
C、X为葡萄糖生成Y为丙酮酸的过程生成4mol的[H]，C错误；
D、③为氨基酸脱水缩合发生在核糖体上，核糖体位于细胞质中，D正确。
故选C。
【题目】为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先合成两条引物，并获得细菌的_______________________。
(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的____________________端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的_________________________。
(3)进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中________的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）
①加热至90～95℃(变性)
②冷却至55～60℃(复性)
③加热至70～75℃(延伸)
④90～95℃维持时间
⑤55～60℃维持时间
⑥70～75℃维持时间
(4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：
图中虚线框内mRNA片段包含________个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。
(5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：
缓冲液 | 50 mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 | 50 mmol/LGly-NaOH | 50 mmol/LTris-HCl | ||||||||||
pH | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 7.5 | 8.0 | 8.5 | 9.0 | 9.0 | 9.5 | 10.0 | 10.5 | |
酶相对活性% | 25.4 | 40.2 | 49.8 | 63.2 | 70.1 | 99.5 | 95.5 | 85.3 | 68.1 | 63.7 | 41.5 | 20.8 | |
根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为___________________________
