Question

【题目】我国肝损伤病的发生率较高，据研究，不同浓度的胰岛素对减缓肝

细胞损伤有保护作用，且胰岛素浓度越高保护作用越强：LPS是一种导致肝损伤的常见物质（用生理盐水配制）。现欲以大鼠为材料验证上述结论，回答下列问题：

（1）材料制备：

①肝细胞悬液的制备：取某健康幼年大鼠的肝脏，适宜条件下取出剪碎再用______酶消化，经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞，加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行______培养，将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组，编号为A-E，每组均需再______，置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。

②胰岛素溶液：用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液，分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。

（2）实验方案及结果预期：

①A组作为空白对照组，则往B、C、D、E组还需加入等量的______。

②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标，各组的存活细胞数先用______测出OD值，然后计算各组的细胞存活率=该组OD值/A组OD值*100%，不考虑细胞死亡对OD值的影响。

③用柱形图表示各组的实验结果。______

（3）实验从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有______（至少写出二点）。

Answer 1

【答案】胰蛋白 原代 设置多个重复样液 LPS 比色计 延缓细胞分裂、延缓细胞凋亡

【解析】

根据题意，该实验的实验目的为验证不同浓度的胰岛素对减缓肝细胞损伤有保护作用，且胰岛素浓度越高保护作用越强。实验自变量为不同浓度的胰岛素，因变量为细胞损伤程度，可以用细胞的存活率来表示；为了使实验更具有科学性，需要设置空白对照组和经作用后的对照组。

根据实验目的、实验设计原则和实验的部分步骤，依据动物细胞培养的过程，可进行如下操作：

（1）材料制备：

①肝细胞悬液的制备：取某健康幼年大鼠的肝脏，适宜条件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞，加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行原代培养，将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组，编号为A-E，每组均需再设置多个重复样液，置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。

②胰岛素溶液：用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液，分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。

（2）实验方案及结果预期：

①A组作为空白对照组，则往B、C、D、E组还需加入等量的LPS。

②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标，各组的存活细胞数先用比色计测出OD值，然后计算各组的细胞存活率=该组OD值/A组OD值*100%，不考虑细胞死亡对OD值的影响。

③实验结果应为：胰岛素浓度越高，细胞存活率越大，故用柱形图表示各组的实验结果：

（3）实验从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有延缓细胞分裂、延缓细胞凋亡等。