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(09惠州市三调)(现代生物科技专题,l0分)10月6日下午诺贝尔评委会公布2008年诺贝尔生理学或医学奖获奖者名单,德国癌症研究中心主席、宫颈癌主要致病病因的发现者楚尔郝森(Haraldzur Hausen)以及法国吕克?蒙塔尼耶(Luc Montagnierr)和雷一西诺希FranoiseBarrse-Sinousi三人获得2008年诺贝尔生理学或医学奖。在诺贝尔评委会引述的评语中说,Barrse-Sinousi和Montagnier的发现是目前人们理解艾滋病毒生物学及其抗逆转录病毒治疗的先决条件和里程碑。两人的工作在上世纪80年代初使人们有可能克隆出HIV―l病毒基因组。评委会在说到楚尔郝森zurHausen得奖研究成果中说,当他发现致癌人乳头状瘤病毒或人乳头瘤病毒引起子宫颈癌,他敢于顶住当前的教条,提出自己独特的见解。
(1)艾滋病毒侵入人体后,请写出在宿主细胞内合成核衣壳蛋白的主要步骤 。
(2)人类乳头状瘤病毒(HPV)是一种嗜上皮性病毒,属双链闭环的小DNA病毒,包含约8000个碱基对。请问由8000个碱基对形成HPV的DNA分子时,可生成 个水分子。
(3)建立可靠的人乳头状瘤病毒检测方法可以监控子宫颈癌的发病情况,请问可用哪些方法检测病毒的存在?(列举两种方法) 。
(4)请你利用细胞工程方法,以小鼠为实验对象,写出以HPV棱衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的主要思路 。
答案:
(1)以HIV的RNA为模板在逆转录酶作用下台成HIV的DNA,以HIV的DNA为模板转录生成病毒的mRNA,再翻译成核衣壳蛋白。
(2)16000
(3)①HPV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术);②HPV病毒蛋白的检测(获得抗血清,利用抗原一抗体的杂交反应,判断病毒是否存在)。
(4)用HPV棱衣壳蛋白为抗原注射小鼠获取效应B细胞,用效应B细胞和骨髓瘤细胞在体外进行细胞融合,然后用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞.通过细胞培养获取大量的杂交瘤细胞和大量的单克隆抗体。
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