如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌示意图.所用载体为质粒A．已知细菌B细胞内不含质粒A.也不含质粒A上的基因.质粒A导入细菌B后.其上的基因能得到表达.探究:(1)图中所示的基因工程操作中目的基因是 .受体细胞是．(2)如何将目的基因和质粒相结合形成重组质粒? ．(3)目前把重组质粒导入细菌细� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A．已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，探究：

（1）图中所示的基因工程操作中目的基因是

，受体细胞是

．
（2）如何将目的基因和质粒相结合形成重组质粒（重组DNA分子）？

．
（3）目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒，有的导入的是普通质粒A，只有少数导入的是重组质粒．此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有．使用这种方法鉴别的原因是

．
（4）若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养，会发生的现象是

．
（5）导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么？

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：图示表示将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的过程．质粒A上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因，构建基因表达载体后，破环了质粒A的四环素抗性基因，但氨苄青霉素抗性基因正常，所以导入重组质粒或普通质粒的大肠杆菌都能抗氨苄青霉素，但导入重组质粒的大肠杆菌不能抗四环素．

解答： 解：（1）分析图示可知，图中所示的基因工程操作中目的基因是人的生长激素基因，受体细胞是细菌B．
（2）将目的基因和质粒相结合形成重组质粒（重组DNA分子）：①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性未端的切口；②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性未端；③将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒．
（3）将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入了普通质粒A或重组质粒，反之则没有．使用这种方法鉴别的原因是普通质粒和重组质粒均含有抗氨苄青霉素基因，其表达产物能分解青霉素．
（4）若把通过鉴定证明导入普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养，由于普通质粒上有抗四环素基因，重组质粒上的该基因由于目的基因的插入而被破坏，因此培养基中的细菌有的能生长，有的不能生长．
（5）基因成功表达的标志是受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质，即人的生长激素．
故答案为：
（1）人的生长激素基因细菌B
（2）①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性未端的切口；②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性未端；③将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒
（3）普通质粒和重组质粒均含有抗氨苄青霉素基因，其表达产物能分解青霉素
（4）有的能生长，有的不能生长
（5）合成人的生长激素

点评：本题结合“工程菌”的制造过程，考查基因工程的应用，要求考生识记基因工程的基本操作步骤，能分析题图，明确目的基因插入质粒后会破坏质粒的四环素抗性基因，再对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．

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