题目内容
已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下:
(1)实验步骤①所代表的反应过程是_______________
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用______________、________________
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行________,也不能进行______________。
(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征,可用_______________与______________________进行抗原—抗体特异性反应实验,从而得出结论。
(5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”),根本原因是_______________________________。
(16分,每格2分)
答案 (1)逆转录 (2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶 (3)复制 以其为模板合成S基因的mRNA(或转录)(4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清 (5)相同 表达蛋白质所用的基因相同
解析试题分析:本题考查基因工程的相关知识。
(1)实验步骤①RNA控制DNA合成,该过程是逆转录。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B,必须使用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体,形成相同的粘性末端,再用DNA连接酶,形成重组DNA。
(3)如果省略步骤②基因表达载体的构建,而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行复制,也不能进行以其为模板合成S基因的mRNA(或转录)。
(4)步骤④检测所表达的S蛋白的特征,可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原—抗体特异性反应实验,如果能够特异性的结合,说明表达成功。
(5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同,根本原因是表达蛋白质所用的目的基因相同。
考点:基因工程的步骤。
点评:本题有一定的综合性,意在考查学生识记和理解能力。