Question

【题目】下图是培育转基因山羊，并通过乳腺生物反应器来生产人β-酪蛋白的流程图。请分析并回答下列问题：

（1）过程①构建重组基因表达载体时，需要的工具酶有_________。过程②将目的基因导入受精卵时常用的方法是_________，选用受精卵作为受体细胞的原因是____________________________________。

（2）要实现超数排卵，应在山羊发情周期的某一阶段用_________处理。获得的精子需要进行_________后才具有受精能力。

（3）早期胚胎一般发育到_________时期，再经过程③将其移植到受体母羊体内。对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的________细胞进行鉴定，一般采用SRY—PCR方法，选择出现阴性反应的_________（性别）胚胎进行移植。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA连接酶 显微注射法 受精卵的全能性最高，能发育成个体 促性腺激素 获能处理 桑椹胚或囊胚 滋养层 雌性

【解析】

分析题图：图示为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，②表示将基因表达载体导入受体细胞受精卵，③表示胚胎移植过程，④表示人β-酪蛋白基因表达。

（1）基因工程的过程中需要用限制酶切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶将两者连接，故过程①表示构建重组基因表达载体，在这个过程中需要用到限制酶和DNA连接酶；过程②是将目的基因导入受体细胞受精卵，常用的方法是显微注射法；由于动物细胞全能性受到限制，只有细胞核具有全能性，而受精卵的全能性最高，能发育成个体，故常选用受精卵作为受体细胞。

（2）促性腺激素能促进性腺发育及性激素的分泌，故要实现超数排卵，应在山羊发情周期的某一阶段用促性腺激素处理；获得的精子需要进行获能处理后才具有受精能力。

（3）由于桑椹胚或囊胚的胚胎还没有和母体建立联系，故早期胚胎一般发育到桑椹胚或囊胚时期，再经过程③将其移植到受体母羊体内；滋养层的细胞将来发育成胎膜胎盘，对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定；SRY—PCR方法是用来检测Y染色体的，一般采用SRY—PCR方法进行性别鉴定，选择出现阴性反应的即为雌性动物胚胎进行移植。