Question

【题目】几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：

(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是__________________________。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是__________________________。

(2)以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是__________________________。

(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是__________________________(答出两点即可)。

(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是____________。

(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是__________________________。

Answer 1

【答案】 基因表达强烈 相应mRNA多抑制RNA被水解 逆转录过程的碱基互补配对 目的基因因缺少相应的启动子和终止子，缺少复制原点 磷酸二酯键 转录和翻译过程受影响

【解析】试题分析：本题考查基因工程的相关知识，要求识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，再结合所学的知识准确答题。

（1）由于嫩叶组织细胞基因表达强烈，相应mRNA多，因此在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是防止提取的mRNA被RNA酶分解。

（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，原因是在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA，其原理是转录过程的碱基互补配对。

（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是：质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中含有复制原点等。

（4）DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。

（5）基因表达包括转录和翻译两个步骤，若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，其可能的原因是几丁质酶基因没有转录或翻译异常。