题目内容
【题目】胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 _________ 。
(2)图1中启动子是 _________ 酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是 __________________ 。
(3)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于 __________________ 。
(4)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段，这是因为 __________________ 。
(5)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _________ ，理由是 __________________ 。
【答案】终止子 RNA聚合 作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解 β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸 至少2个 两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸的R基中可能还含有游离的氨基
【解析】
本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中信息准确答题。
（1）根据题意和图示分析可知：图1基因表达载体中已有目的基因、启动子和标记基因，所以没有标注出来的基本结构是终止子。
（2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达即转录过程；氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因，能将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来。
（3）β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解。
（4）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸，所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段。
（5）由题图可知，胰岛素由两条肽链组成，一条肽链的一端含有一个游离的氨基，R基上也可能含有氨基，所以每个胰岛素分子中至少含有2个游离氨基。
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