Question

【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建_________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与_________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是_________，细胞融合的原理是_________。

（3）将融合细胞在_________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用_________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物 结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_________的特点。

Answer 1

【答案】 低表达 胞外 骨髓瘤 PEG（或聚乙二醇） 细胞膜的流动性 选择 抗原一抗体杂交 体外培养 特异性强（识别抗原部位专一）

【解析】本题涉及到基因工程、细胞融合技术、单克隆抗体的制备等知识点。主要考察的是单克隆抗体的制备过程，在此过程中有两次筛选，一次是在选择培养上得到杂交瘤细胞，第二次是进行克隆化培养和专一抗体检测阳性，筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。

（2）制备单克隆抗体的过程中，应把小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂为聚乙二醇，细胞融合时遵循的生物学原理是细胞膜的流动性。

（3）融合后的细胞有多种，需要在选择培养基中进行筛选，只有杂交瘤细胞能够生长；在多孔培养板上，吸取克隆生长的细胞培养孔中的上清液进行检测，检测时采用的方法是抗原-抗体杂交的方法。

（4）杂交瘤细胞进行培养时可以采用体外培养或小鼠腹腔中进行培养的方法，可以获得大量的单克隆抗体。