Question

【题目】下图是制备抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白单克隆抗体的过程。请据图回答：

（1）埃博拉病毒(EBOV)的遗传物质是RNA，EBOV病毒容易变异的原因是____________。

（2）科研人员利用小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是_________________，可以用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“_______________ ”，抗击埃博拉病毒(EBOV)。

（3）利用PCR获取目的基因的过程中，反应体系内要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根据________________________合成的引物。

（4）选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是 ___________________________ ；VP40基因进入大肠杆菌细胞，并在大肠杆菌内维持稳定和表达，该过程可称为_____________。

（5）过程⑥常用的不同于植物原生质体融合的促融方法是用_________________处理。

Answer 1

【答案】RNA是单链结构，稳定性差，突变率高 经EBOV免疫后特异性强、灵敏度高、可大量制备 生物导弹 目的基因的核苷酸序列 防止自身环化 转化 灭活的病毒

【解析】

据图分析，图示过程涉及到基因工程的基本步骤和单克隆抗体的制备过程，其中①表示获取目的基因，②表示构建基因表达载体，③表示将目的基因导入导入大肠杆菌，④表示从大肠杆菌获取相应的蛋白质（VP40蛋白），⑤表示注射抗原，提取相应的B淋巴细胞，⑥表示通过细胞融合技术获得形成杂交瘤细胞，⑦表示杂交瘤细胞的体外培养，获得单克隆抗体。

（1）埃博拉病毒（EBO）的遗传物质是RNA，而RNA是单链结构，突变率较高，稳定性较差，所以EBO病毒容易变异。

（2）经EBO免疫后小鼠体内可获取浆细胞，其与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，即单克隆抗体，其特点是特异性强、灵敏度高、可大量制备；可以用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒（EBO）。

（3）PCR技术中，引物是根据目的基因的核苷酸序列合成的。

（4）EcoRⅠ和XhoⅠ切割形成的黏性末端不同，而DNA连接酶只能将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来，因此为了防止目的基因反向连接、目的基因和质粒的自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和XhoⅠ。VP40基因进入大肠杆菌细胞，并在大肠杆菌内维持稳定和表达，该过程称为转化。

（5）过程⑥为诱导动物细胞融合，其不同于植物原生质体的促融方法是用灭活的病毒进行诱导。