Question

【题目】为提高我国稻米的含铁量，通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入了一个高产粳稻品种中，获得了高含铁量转基因水稻株系．如图为培育过程．请分析并回答问题：
（1）获取重组载体用到的“手术刀”是 ， ②过程通常用农杆菌转化法将重组载体导入细胞．
（2）重组载体中标记基因的作用是 ． 检测目的基因是否转录，需用作探针．
（3）图中①③④过程须在条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素，作用是 ．
（4）过程④除了用秋水仙素或低温诱导来处理，还可以采用技术，该技术常用的诱导剂是 ．
（5）上述培育转基因水稻的操作过程中最为核心的步骤是 ．

Answer 1

【答案】
（1））限制酶；愈伤组织
（2）检测目的基因是否导入受体细胞；同位素标记的铁结合蛋白基因
（3）无菌；促进细胞分裂、生长、分化
（4）植物体细胞杂交；聚乙二醇（PEG）
（5）基因表达载体的构建
【解析】解：（1）获取重组载体用到的“手术刀”是限制性核酸内切酶．由图可知，②过程通常用农杆菌转化法将重组载体导入愈伤组织细胞．（2）重组载体中的标记基因的作用是检测目的基因是否导入受体细胞．检测目的基因是否转录，需用同位素标记的铁结合蛋白基因作探针，然后再采用分子杂交法．（3）图中基因工程的操作以及植物的组织培养过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素，作用是促进细胞分裂、生长、分化．（4）由于花药培养出的细胞染色体是体细胞的一般，因此过程④用秋水仙素或低温诱导来处理是为了让细胞的染色体数目加倍，该过程还可以采用植物体细胞杂交技术，该技术常用的诱导剂是聚乙二醇．（5）上述培育转基因水稻采用了基因工程技术，其核心步骤是基因表达载体的构建． 所以答案是：（1）限制酶；愈伤组织（2）检测目的基因是否导入受体细胞；同位素标记的铁结合蛋白基因（3）无菌；促进细胞分裂、生长、分化（4）植物体细胞杂交；聚乙二醇（PEG）（5）基因表达载体的构建
【考点精析】根据题目的已知条件，利用基因工程的原理及技术和植物培养的条件及过程的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术；植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株．