题目内容
(12分)降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的 DNA单链,两条链通过 18个碱基对形成部分双链 DNA片段,再利用 Klenow酶补平,获得双链 DNA,过程如图。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:
(1)Klenow酶是一种 酶,合成的双链DNA有 个碱基对。
(2)获得的双链 DNAEcoRI(识别序列和切割位点-G↓ AATTC-)和 BamHI(识别序列和切割位点-T↓TATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA测序验证
①大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它 。
②设计EcoRI和 BamHI双酶切的目的是 。
③要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有 。
(3)经 DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是 。
(4)人工合成的目的基因与人体内的降钙素基因在结构上不同之处在于 。
(5)如果从人体细胞中直接提取目的基因并导入细菌中,能否获得降钙素,为什么?
(12分)(1)DNA聚合酶126(2分)
(2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(2分)
②保证目的基因和运载体定向连接(或防止目的基因和运载体在酶切后产生的末端发生任意连接)(2分)
③标记基因(1分)
(3)合成的核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基的现象(1分)
(4)人工合成基因无人降钙素基因中的内含子序列(1分)
(5)不能(1分),因为直接提取的目的基因中包含内含子与外显子序列,导人细菌中,细胞不能识别内含子区段,而会全部进行编码.台成的多肽则不是降钙素(2分)
解析