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(09深圳市调研)(生物技术实践,10分)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。

(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将____________的末端称为5’端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的_________开始延伸DNA链。

(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到__________________,它的发现和应用解决了上述问题;要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫___________________________。

(3)PCR的每次循环可以分为__________________三步。假设在PCR反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有_________个这样的DNA片段。

(4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。

 

 

(5)简述PCR技术的主要应用。

 

答案:(1)磷酸基团    3端  

(2)耐高温的TaqDNA 聚合酶      选择培养基         

(3)变性、复性和延伸    32      

(4)(标出4个DNA分子,标对引物)

 
 

(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定

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