Question

【题目】血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程)，还能间接激活体内纤溶酶原(B 过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答问题：

【1】人们所需的纳豆激酶必需通过分离提纯才能获得，下面是分离提纯的步骤，其基本顺序是_______________。

①层析提纯 ②过滤 ③沉淀 ④破碎细胞 ⑤酶制剂 ⑥冷冻干燥

使酶蛋白沉淀通常采用改变pH或加入_____________。

【2】研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将____________滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明___________________________________________。

【3】NK 的间接作用是通过_____________________________________激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】请根据下列给出的实验材料，比较NK 与内源性纤溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，补全相应内容。

供选实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、蛋清溶液，缓冲液、双缩脲试剂、量筒、试管和秒表。

实验步骤：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物质的成分	试管1	试管2
1	A	+	+
2	缓冲液	+	+
3	纳豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

①表格中A处添加的物质是_____________，B处添加的物质是____________。

②实验结果的鉴定所用的观察方法是 _________________________________。

Answer 1

【答案】

【1】 ④②③①⑥⑤ 硫酸铵

【2】 纳豆激酶（或NK） NK对纤维蛋白有直接水解作用或降解作用(NK在体外有溶栓效果)

【3】刺激血管上皮细胞，释放组织纤溶酶原激活剂

【4】 纤维蛋白块 内源性纤溶酶溶液 观察记录蛋白块消失的时间

【解析】

1、识图分析可知，图中纳豆激酶(NK)一方面直接作用于纤维蛋白，使纤维蛋白降解，溶解血栓；另一方面纳豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮细胞，使血管上皮细胞释放组织纤溶酶原激活剂激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。

2、分析题干信息可知，该实验的目的是比较NK与内源性纤溶酶溶栓效果，因此实验的自变量是酶的种类，因变量是纤维蛋白块的消失的时间，其他如试验用的纤维蛋白块大小、缓冲液的浓度和体积、酶的浓度和体积属于无关变量，无关变量应该保持一致。

【1】由题意知，纳豆激酶（NK）是由纳豆菌产生的蛋白酶，因此纳豆激酶分离提纯的过程是先破碎细胞释放纳豆激酶，然后经过过滤、沉淀，层析提纯，再通过冷冻干燥获得酶制剂，即④②③①⑥⑤；使酶蛋白沉淀的常用方法是改变PH或加入硫酸铵。

【2】分析题图可知，纳豆激酶（NK）能直接作用于纤维蛋白，使纤维蛋白降解；将纳豆激酶（或NK）滴加在给定纤维蛋白平板上，可以检验纳豆激酶（NK）直接降解纤维蛋白的作用，如果现相应的溶解圈，说明NK对纤维蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在体外有溶栓效果）。

【3】分析题图可知，纳豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮细胞，使血管上皮细胞释放组织纤溶酶原激活剂激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】①根据以上分析可知，该实验的目的是比较NK与内源性纤溶酶溶栓效果，实验的自变量是酶的种类，因变量是纤维蛋白块的消失的时间，其他如试验用的纤维蛋白块大小、缓冲液的浓度和体积、酶的浓度和体积属于无关变量，无关变量应该保持一致。因此A处加入的物质应该是纤维蛋白块，B加入的物质是内源性纤溶酶溶液。

②通过比较蛋白块消失的时间的长短比较NK与内源性纤溶酶溶栓效果。

本题以纳豆激酶（或NK）的溶解血栓的机理为背景考查学生的获取信息的能力以及解决问题的能力，要求学生能够正确识图分析，判断出纳豆激酶（或NK）的溶解血栓的机理的途径，这是该题考查的重点；同时利用所学的酶的提纯的知识点解决问题，掌握实验设计的基本原则，能够结合题意正确判断实验的目的，找出实验的自变量、因变量和无关变量，这是该题第4小题解决的关键。