Question

【题目】某校生物兴趣小组进行探究“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”实验，用血细胞计数板计数酵母菌数量。血细胞计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻璃制品，样品滴在计数室内。计数室由25个中格、每个中格由16个小格、总共400个小格组成，每个计数室容纳液体的总体积为0.1 mm3。请分析并回答问题：

（1）在吸取酵母菌培养液前应先将培养瓶______，滴加培养液时应先______，再滴加培养液。

（2）制片时，某同学进行了如下图所示的操作，他统计出来的酵母菌数值比实际值______(选填“偏大”、“偏小”或“基本不变”)。

（3）若对培养液中酵母菌逐个计数是非常困难的，故通常采用______法进行计数，图1是计数室中一个中格的酵母菌分布示意图(●代表酵母菌)，该中格内酵母菌数量应计为______个。

（4）现观察到图2中所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内有酵母菌40个，则1 mL酵母菌培养液样品中菌体数最接近______个。几天后，由于酵母菌大量繁殖，每次计数前，需要对酵母菌样液进行______处理，以方便计数。

（5）研究结果表明，酵母菌种群数量变化在一段时间内呈______型曲线增长。

Answer 1

【答案】振荡盖盖玻片偏大抽样检测62×106稀释S

【解析】

1、滴加培养液时应先盖盖玻片，再滴加培养液。

2、酵母菌个数计算：

① 16×25型的计数公式为：

酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数

②25×16型的计数公式为：

酵母细胞个数／1mL ＝80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数

（1）吸取培养液前应将培养瓶轻轻振荡，使酵母菌均匀分布。滴加培养液时应先盖盖玻片，再滴加培养液。这样可以尽可能保证计数室被培养液充满，以减少误差。

（2）图中是先滴加菌液，再加盖玻片，容易使菌液沾到计数平台两侧的支持柱表面，在支持柱表面形成一层水膜而使盖片不能完全落在支持柱上。盖玻片由于液滴的表面张力作用而未能严密的盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大，计数结果将偏高。

（3）培养液中酵母菌的数量比较多，逐个计数是非常困难的，通常采用抽样检测法进行计数。镜检计数方法：①方格内细胞的计数顺序为左上→右上→右下→左下。②压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数。③细胞若有粘连，要数出团块中的每一个细胞。④出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2，则算出独立个体。⑤计数总数不少于300个细胞。压在方格线上左线和上线的细胞数各1个，方格内细胞数是4个，因此该中格内酵母菌数量应计为6个。

（4）1 mL=1cm3=1000 mm3，1 mL酵母菌培养液样品中菌体数约为：(1000 mm3/0.1 mm3) ×25×(40/5)=2×106。几天后，由于酵母菌大量繁殖，可能粘连在一起，为了方便计数，每次计数前，需要对酵母菌样液进行稀释。

（5）由于资源和空间有限， 酵母菌呈“S”型曲线增长。