Question

【题目】2019年非洲猪瘟导致大量生猪死亡，造成重大经济损失，为了尽快恢复生猪养殖，加快猪仔的供应，采用了图示现代生物技术，为防止早期胚胎细胞异常凋亡，导入细胞调亡抑制基因Bcl-2，请回答下列问题：

（1）①过程需要对母猪注射____________激素，②过程体外受精前需要对精子进行____________处理，卵母细胞需要发育到____________期，才具备与精子受精的能力。⑤过程将获得的早期胚胎移植到经过____________处理的受体母猪子宫内。

（2）利用PCR技术扩增获得Bcl-2基因时，在第____________次循环结束后即可出现两条链等长的目的基因片段。④过程需要用到限制酶和DNA连接酶，两种酶作用的化学键____________（填“相同”或“不相同”）。

（3）基因表达载体导入受精卵常用____________法。用____________做探针，检测Bcl-2基因在受精卵中是否转录出mRNA。

Answer 1

【答案】促性腺 获能 减数第二次分裂中 同期发情 3 相同 显微注射 放射性同位素标记的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段

【解析】

图示为利用转基因技术、体外受精技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术培育转基因猪仔的过程，其中①过程为卵母细胞和精子的采集，②过程为体外受精过程，③为载体，④过程为基因表达载体的构建，⑤过程为胚胎移植，⑥过程为妊娠过程。

（1）①过程包括卵母细胞的采集，需要对母猪注射促性腺激素，使其排出更多的卵子；②过程体外受精前需要对精子进行获能处理，即利用培养法或化学诱导法使其获得受精能力，卵母细胞需要发育到减数第二次分裂中期才具备与精子受精的能力。⑤过程将获得的早期胚胎移植到经过同期发情处理的受体母猪子宫内。

（2）根据DNA的半保留复制，利用PCR技术扩增获得Bcl-2基因时，在第3次循环结束后即可出现两条链等长的目的基因片段。④过程构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，二者都作用于磷酸二酯键。

（3）基因表达载体导入受精卵常用显微注射法，检测目的基因是否在受体细胞中表达采用分子杂交技术，可用放射性同位素标记的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段做探针，检测Bcl-2基因在受精卵中是否转录出mRNA。