Question

【题目】基因工程

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系，为解决我国的粮食问题做出了重要贡献。

几种限制酶识别序列及切割位点表

限制酶	AluⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
切割位点

【1】图中过程①是基因工程的______步骤，除了图示方法外，还可以用______方法达成同一目的。

【2】过程②采用PCR技术是为了实现基因的扩增，该过程需要用到的原料主要是______。

【3】如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在图中两侧的A和B位置接上______限制酶识别序列。如果从连接效率更高的角度，最好选择____________________

A．EcoRⅠ和EcoRⅠ
B．PstⅠ和SmaⅠ
C．EcoRⅠ和PstⅠ
D．EcoRⅠ和SmaⅠ

【4】从基因工程的分类上，图示的基因工程属于______基因工程。

【5】耐盐碱基因成功导入了水稻细胞中，是否一定意味着该基因工程取得了成功？______，如果是请分析原因，如果否请提出一个从个体水平检测该基因工程是否成功的方案。______。

Answer 1

【答案】

【1】 获取目的基因 从生物体细胞中分离（限制酶切）

【2】4种脱氧核苷酸

【3】 ABCD C

【4】植物

【5】 不一定 将植物种植在盐碱地中，观察其是否能正常生长

【解析】

分析题图：图示表示应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系的过程，其中①表示以mRNA为模板逆转录形成DNA；②表示采用PCR技术扩增目的基因；④表示基因表达载体的构建过程；⑤表示将目的基因导入大肠杆菌，使其大量繁殖；⑥⑦表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞。

【1】图中①表示获取目的基因；该步骤中，除了图示方法外，还可以从生物体细胞中分离（限制酶切）获得目的基因。

【2】过程②扩增目的基因需要的原料是4种游离的脱氧核糖核苷酸。

【3】图中质粒上含有限制酶EcoRⅠ、PstⅠ和SmaⅠ的识别序列和切割位点，且限制酶EcoRⅠ的切割位点有两个，因此如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在图中两侧的A和B位置接上限制酶EcoRⅠ和EcoRⅠ或PstⅠ和SmaⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ或EcoRⅠ和SmaⅠ的识别序列。连接限制酶EcoRⅠ和EcoRⅠ可能会导致反向连接或自身环化；连接限制酶PstⅠ和SmaⅠ或连接限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ，由于存在平口末端，而DNA连接酶连接平口末端时效率比较低。故选C。

【4】从基因工程的分类上，图示的基因工程属于植物基因工程。

【5】耐盐碱基因成功导入后不一定能表达，因此目的基因成功导入了水稻细胞中，不一定意味着该基因工程取得了成功；从个体水平检测该基因工程是否成功的方案：将植物种植在盐碱地中，观察其是否能正常生长。

本题结合耐盐碱水稻新品系的培育过程图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，能准确判断图中各过程的含义，再结合图中信息准确答题。