题目内容
【题目】真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示从基因文库提取胰岛素基因的过程。回答下列问题：
(1)从基因结构分析，与基因组文库中的基因相比，cDNA文库中获得的目的基因少了___ 等结构（至少写两个）。
(2)将获得的胰岛素基因导入受体菌内，并在受体菌内维持稳定和表达的过程，在基因工程中称为 ___。
(3)过程⑤需将纤维素膜上的细菌裂解，释放出____，再用32P标记的____作为探针进行杂交。依据杂交结果，应选取培养基上 _____（填字母）菌落继续培养，才能获得含有胰岛素基因的受体菌。
(4)经过目的基因的检测和表达，从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性，导致这种差异的原因可能是____。
(5)与从基因组文库获取目的基因相比，图示方法获得的目的基因在受体菌中更容易表达，原因是________。
【答案】 启动子、终止子、内含子 转化 DNA 目的基因（或胰岛素基因） a 受体菌中基因表达获得的蛋白质未加工 cDNA中不含有内含子，转录出的RNA不需要经过加工，可直接作为合成蛋白质的模板
【解析】试题分析：本题考查基因工程，考查对目的基因获取、检测与鉴定的理解。解答此题，可根据真核细胞和原核细胞细胞器的不同分析从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性的原因。
(1) cDNA文库是由mRNA经逆转录而来，成熟的mRNA已经切除了内含子对应的碱基序列，且mRNA不含有启动子、终止子对应的碱基序列，因此cDNA文库中获得的目的基因少了启动子、终止子、内含子等结构。
(2)将获得的胰岛素基因导入受体菌内，并在受体菌内维持稳定和表达的过程，在基因工程中称为转化。
(3)过程⑤用32P标记的目的基因（或胰岛素基因）单链作为探针检测受体菌中是否含有目的基因，首先需将纤维素膜上的细菌裂解，释放出DNA。培养基上 a菌落对应位置出现杂交带，说明a菌落是由含有胰岛素基因的受体菌形成的。
(4)大肠杆菌中没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对核糖体合成的肽链进行有效的折叠、加工，所以从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性。
(5) cDNA文库中获得的目的基因没有内含子，转录出的RNA不需要经过加工，可直接作为合成蛋白质的模板，所以在受体菌中更容易表达。
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