Question

【题目】科学家从链霉菌提取抗除草剂基因（bar基因），培育抗除草剂作物。回答下列问题：

（1）下图是重组质粒示意图，据图分析，需用________酶处理链霉菌的DNA，以提取目的基因。为了筛选出成功导入bar基因的受体细胞，需在受体细胞培养基中添加_________。

（2）将种子的胚划伤,简称划胚。请说出农杆菌把将bar基因导入划胚细胞的过程。____________________

（3）某兴趣小组要探究各种划胚方式（包括横划、纵划和穿刺）对bar基因导入大豆种子胚细胞效率的影响。请将有关实验步骤补充完整。

步骤1：______________________中培养2-3天。

步骤2：用____________________技术鉴定萌发植株的细胞是否导入bar基因。

（4）下表是不同植物对除草剂耐受性研究的实验结果。据表分析可知，玉米对除草剂耐受性最大，判断依据是___________________________。

不同浓度的除草剂处理后植物苗存活率

Answer 1

【答案】 BamHⅠ和BgIⅡ 潮霉素 伤口处的胚细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，使bar基因随Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞 将数量相等的各种划胚方式的种子，浸泡在带bar基因的农杆菌菌液 DNA分子杂交 随着除草剂浓度的增加，玉米成活苗数下降幅度最小，且高于大豆和高粱（或“与大豆和高梁相比，在不同除草剂浓度下，玉米苗的存活率最高”）

【解析】试题分析：基因工程的基本步骤包括：目的基因的获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。据图分析，图中重组质粒包括启动子、终止子、目的基因（bar基因）、标记基因（潮霉素抗性基因）。

（1）据图分析，目的基因（bar基因）两侧的限制酶切点是BamHⅠ和BgIⅡ的，说明提取目的基因时用了这两种酶进行了切割。标记基因的作用是检测目的基因是否导入了受体细胞，所以可以用含有潮霉素的培养基筛选含有目的基因的受体细胞。

（2）将目的基因导入受体细胞过程中，将种子的胚划伤，伤口处的胚细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，使bar基因随Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞。

（3）实验的自变量是划胚方式，因变量是对bar基因导入大豆种子胚细胞效率的影响，所以实验的基本步骤为：将数量相等的各种划胚方式的种子，浸泡在带bar基因的农杆菌菌液中培养2-3天；用DNA分子杂交技术鉴定萌发植株的细胞是否导入bar基因。

（4）根据表格分析，随着除草剂浓度的增加，玉米成活苗数下降幅度最小，且高于大豆和高粱，所以玉米对除草剂耐受性最大。