题目内容
(9分)回答下列有关生物工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点;图2是转基因香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
1.图1是用限制酶_________________进行切割得到的目的基因,可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后____。
2.从图2中反映质粒作为运载体的特点是___________________。基因工程中还可以用___________________作为运载体。
3.图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是 ________________。
4.图2中④表示组织培养过程中的________,它对植物激素调节的要求是______________。
5.图2中的农杆菌是基因工程中的________________。判断该转基因工程是否成功的依据是_________。
1. BamHI和HindIII 自身环化
2.有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存(至少写2点)
噬菌体或动植物病毒(或病毒)
3.SmaI酶会破坏目的基因和质粒
4.去分化 生长素与细胞分裂素浓度的比值约为1
5. 含目的基因的受体 该目的基因在香蕉中是否成功表达。
【解析】本题考查基因工程的基础知识,图1是用限制酶BamHI和HindIII 进行切割得到的目的基因,可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化,质粒作为运载体的特点有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存,图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是SmaI酶会破坏目的基因和质粒,其余详解见答案。
(9分)请回答下列有关温度与酶活性的问题:
(1)温度对唾液淀粉酶活性影响的实验:
将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组,共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组,维持各自的温度5min。然后,将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后继续放回原来的温度下保温。把________的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟,取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察,记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中____消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计___温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。
(2)温度对酶活性的影响主要体现在两个方面。其一,随温度的升高会使___接触的机会增多,反应速率变快。其二,因为大多数酶是蛋白质,随温度升高____会发生改变,温度升到一定程度,酶将完全失活。这两种作用叠加在一起,使酶促反应在某一温度下最快,这一温度就是该酶的__。
(3)科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中,得到了多种突变酶,测得酶50%发生变性时的温度(Tm),部分结果见下表:
酶 |
半胱氨酸(Cys)的位置和数目 |
二硫键数目 |
Tm/℃ |
野生型T4溶菌酶 |
Cys51,Cys97 |
无 |
41.9 |
突变酶C |
Cys21,Cys143 |
1 |
52.9 |
突变酶F |
Cys3,Cys9,Cys21,Cys142,Cys164 |
3 |
65.5 |
(注:Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置)
溶菌酶热稳定性的提高,是通过改变__和增加___得以实现的。从热稳定性高的酶的氨基酸序列出发,利用___方法获得目的基因,通过基因工程的手段,可以生产自然界中不存在的蛋白质。
(10分,每空1分)请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题:
(1)微生物培养基一般都含有:水和无机盐以及
(2)在微生物接种过程中,试管口需要通过酒精灯火焰,其目的是 。
(3)某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10g该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:121、212、256.则每克该土壤样品中的菌落数为 。
(4)分离分解尿素的微生物的实验流程包括:土壤取样、梯度稀释、样品涂布到 培养基上、挑选 。
(5)植物组织培养技术基本操作的正确顺序是( )
①外植体消毒 ②制备MS培养基 ③接种 ④培养 ⑤栽培 ⑥移栽
A.①→②→③→④→⑤→⑥ B.②→①→③→④→⑤→⑥
C.②→①→③→④→⑥→⑤ D.①→②→③→④→⑥→⑤
(6)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。
(7)通过电泳法分离提纯蛋白质时,影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、
分子大小以及 。
(8)写出酵母菌有氧呼吸反应式: 。
(9)写出醋酸菌将乙醇转化为醋酸的反应简式: 。