题目内容

【题目】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中,使其分泌出有活性的白细胞介素。

(1)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有___________,还应有____________________,以利于外源基因的表达。

(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前,经常用Ca2+处理酵母菌细胞,主要目的是_________________

(3)白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程,称为_________

(4)为了能成功表达出白细胞介素不使用细菌,而使用酵母菌细胞作为受体细胞,可能原因是_______________________

【答案】标记基因 启动子和终止子 使其成为感受态细胞,有利于吸收重组DNA分子 转化 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器/酵母菌有加工白细胞介素的内质网、高尔基体等细胞器

【解析】

基因工程在完成重组质粒的搭建后需要将重组DNA分子导入受体细胞中并检查目的基因的表达情况。重组DNA分子根据受体细胞的不同将选择不同的方式进行导入,如动物细胞常采用显微注射法,植物细胞采用农杆菌转化法,微生物采用氯化钙处理;检查目的基因的表达情况分为分子水平和个体水平的检测,分子水平中有DNA分子杂交、DNA-RNA分子杂交和抗原-抗体杂交。

1)为了便于鉴别外源基因是否已经转入受体细胞中,外源基因常携带标记基因用于鉴别;同时为了利于外源基因的表达也应有启动子和终止子;

2Ca2+处理酵母菌细胞,用于增加酵母菌细胞壁的通透性,使其成为感受态细胞,有利于吸收重组DNA分子;

3)白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化;

4)由于细菌内不含除核糖体外的细胞器,不便于白细胞介素的合成,但酵母菌中含有能够加工白细胞介素的细胞器,因此使用酵母菌做受体细胞。

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