Question

【题目】图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC．↓GATC．CCC↓GGG。下列分析中正确的是（ ）

A．若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏2个磷酸二酯键

B．若图1所示DNA虚线方框内的碱基对被T－A替换，用限制酶SmaⅠ完全切割后会产生3种不同的DNA片段

C．若切割图2中的质粒以便拼接目的基因D应选择限制酶 BamHⅠ和MboⅠ

D．若用上一选项中的条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内，则此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活

Answer 1

【答案】D

【解析】试题分析：若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏4个磷酸二酯键，A错误；从杂合子（Dd）分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有4种不同DNA片段，B错误；目的基因两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒，所以应选用限制酶BamHⅠ切割，C错误；用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，用限制酶MboⅠ切割质粒后，破环抗生素A、B抗性基因，此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活，D正确。