题目内容
【题目】回答下列（一）、（二）小题：
（一）早在北宋年间，我国就有红枣酒酿造的相关记载，其基本工艺流程为：洗净消毒—破碎榨汁—加曲发酵—过滤陈酿。回答下列问题：
（1）消毒过程中可以用__________溶液浸泡适当时间，再用清水冲洗。
（2）为获得品质较高的红枣汁，可加入果胶酶，能生产果胶酶的微生物有__________，与细菌培养基不同，该微生物生长要求的酸碱环境是__________。配制的培养基应在高压蒸汽灭菌__________（前/后）调节酸碱度。果汁制作后可用__________鉴别是否仍有较多果胶存在。
（3）在澄清果汁中加纯种酵母液，在__________________条件下产生酒精和二氧化碳。待静置一段时间后，用__________法取出上清液。
（二）人胰岛素基因的克隆操作过程如右图所示，其中mRNA逆转录形成的DNA称为cDNA。回答下列问题：
（1）提取分离组织细胞中的人胰岛素mRNA时，最应选择________细胞，过程①②需要原料是________。
（2）通过将所有的cDNA构建基因表达载体，去感染细菌，可以建立包括目的基因在内的__________，若使用质粒载体，其上存在__________基因，有助于质粒进入受体细胞中。此过程还可以使用_______作为载体。（A.动物病毒 B.植物病毒 C.噬菌体）。
（3）除了上述方法外，还可以使用__________方法扩增目的基因。不同的是，后者的目的基因若为人胰岛素原基因，需要导入__________（填“真核”或“原核”）受体细胞中。
【答案】 高锰酸钾 苹果青霉（或黑曲霉） 中性偏酸 前 95%乙醇 无氧 虹吸 胰岛β（细胞） （四种）脱氧核糖核苷酸 基因文库 控制质粒DNA转移的（基因） C PCR 真核
【解析】试题分析：本题考查微生物的培养与利用、果酒的制作、基因工程，考查对微生物培养、果酒制作、目的基因获取原理的理解，解答此题，可根据真核细胞和原核细胞基因结构的不同分析人胰岛素原基因应导入的受体细胞。
（1）红枣的消毒可用高锰酸钾溶液浸泡适当时间。
（2）苹果青霉（或黑曲霉）能生产果胶酶。细菌生长要求中性偏碱的环境，霉菌生长要求中性偏酸的环境。配制的培养基应在高压蒸汽灭菌前调节酸碱度。果胶不溶于乙醇，果汁制作后可用95%乙醇鉴别是否仍有较多果胶存在。
（3）酵母菌在无氧条件下通过无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。发酵一段时间后，用虹吸法取出上清液。
（二）（1）人体细胞中只有胰岛β细胞可表达胰岛素基因，提取人胰岛素mRNA时，最应选择胰岛β细胞，过程①②为合成DNA的过程，需要（四种）脱氧核糖核苷酸为原料。
（2）通过将所有的cDNA构建基因表达载体，去感染细菌，可以建立包括目的基因在内的基因（cDNA）文库；若使用质粒载体，其上应存在控制质粒DNA转移的基因，有助于质粒进入受体细胞中。噬菌体可侵染细菌，动物病毒、植物病毒不能侵染细菌，此过程还可以使用噬菌体作为载体。
（3）用PCR技术可扩增目的基因。PCR扩增的人胰岛素原基因含有内含子序列，原核细胞中缺少转录后切除内含子对应序列的机制，因此应将人胰岛素原基因，需要导入真核受体细胞中。
