题目内容
以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料:
a.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激活。
b.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在,DNA核蛋白在1mol·NaCl溶液中溶解度很大,但在0.14mol·NaCl溶液中的溶解度很低,而RNA核蛋白溶于0.14mo1·NaCl溶液。
c.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入2.5倍体积,浓度为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠,可用玻璃棒搅成团取出。
d.DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。
e.实验材料与器械:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mOl·NaCl溶液、1mol·NaCl溶液、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
以下是DNA粗提取实验的步骤,请根据以上阅读材料回答有关问题:
(1)研磨:取10g花椰菜加适量的____________________、____________________和石英砂,研磨成匀浆。
(2)过滤。
(3)将滤液稀释6倍,其目的是:________________________________________。
(4)离心处理,产生沉淀。
(5)取沉淀物,置于2mL1mol·NaC1溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2mL苯酚充分震荡后静止,待其分层后弃其上层的苯酚。这一步的目的是除去______________。
(6)如何将剩余溶液中的DNA提取出来?_____________________________________。
(7)如何证明提取物是DNA分子?___________________________________________。
解析:
(1)1mol· 柠檬酸钠溶液 (3)使DNA核蛋白溶解度逐渐变小而析出 (5)蛋白质 (6)向下层DNA溶液中加入2.5倍体积,浓度为95%的酒精,并用玻璃棒搅拌,使DNA粘着在棒上 (7)向提取物中加入数滴二苯胺,如出现蓝色则可证明提取物是DNA
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