题目内容
【题目】科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示：
（1）基因工程的操作程序中的核心步骤是：_______________，需要的工具酶有_________。
（2）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，能把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA__________________的特点。
（3）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程，在基因工程中称__________。
（4）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是_________________________。
（5）目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是__________________，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是_______________。
【答案】基因表达载体的构建 限制酶和DNA连接酶 可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上 转化 农杆菌转化法 目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA分子上 DNA分子杂交技术
【解析】
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：一是目的基因的获取；二是基因表达载体的构建，此步骤需要将目的基因与运载体重组；三是将目的基因导入受体细胞，此步骤导入受体细胞的是目的基因与载体结合而成的重组DNA分子；四是目的基因的检测与鉴定。
(1) 基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步骤，需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。
(2) 农杆菌中的 Ti质粒上含有T-DNA，T-DNA具有的特点是：可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA分子上。
(3) 转化是指目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。可见，Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程，在基因工程中称为转化。
(4) 题中涉及的将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法。
(5) 目的基因的检测和鉴定，首先要检测受体细胞染色体的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键，所采用的检测方法是DNA分子杂交技术。
