Question

如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生

 

末端．过程②必需的酶是

 

酶，过程③必需的酶是

 

酶．
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用

 

切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入

 

，才可形成C．利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是

 

．
（3）为使过程⑧更易进行，可用

 

（药剂）处理D．
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为

 

．为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成

 

，常用抗原-抗体杂交技术．
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的

 

中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的

 

上．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图．图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程．

解答： 解：（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生平末端．过程②逆转录必需的酶是逆转录酶，过程③DNA双链打开必需的酶是解旋酶．
（2）构建基因表达载体的过程中，必须用相同的限制酶切割A（含目的基因的外源DNA分子）和B（运载体）以产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成C（重组DNA分子）．利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录．
（3）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl₂处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA分子杂交技术．为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用抗原-抗体杂交技术．
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上．
故答案为：
（1）平        逆转录       解旋
（2）同一种限制性内切酶       DNA连接酶       RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录
（3）CaCl₂ 
（4）DNA分子杂交技术　   　蛋白质
（5）T-DNA　    染色体DNA

点评：本题结合利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，考查基因工程等相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程或物质的名称，运用所学的知识答题，难度适中．