题目内容
【题目】科学家通过基因工程的方法,能使大肠杆菌产生人的胰岛素。以下叙述错误的是( )
A.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
B.目的基因的检测与表达过程中没有发生碱基互补配对
C.DNA连接酶和限制性核酸内切酶都是构建重组质粒必需的工具酶
D.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
【答案】B
【解析】
1.基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2.基因工程的工具:
(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
A、目的基因导入受体细胞后,在受体细胞中不一定能成功表达,A正确;
B、目的基因的检测(DNA分子杂交技术、分子杂交技术等)与表达(包括转录和翻译两个步骤)过程中都发生了碱基互补配对,B错误;
C、构建重组质粒必需的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶,C正确;
D、标记基因一般是抗生素抗性基因,因此可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒,D正确。
故选B。