Question

【题目】随着全球环境的恶化和吸烟的影响，人类肺癌的发病率有上升趋势。取人的肺癌细胞免疫过的小鼠以制备能和人的肺癌细胞特异性结合的单克隆抗体，可用于人类肺癌的免疫检测，其制备流程如图所示。请回答下列问题

（1）为获得人的肺癌细胞免疫过的小鼠，需要将______________注射到小鼠体内。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是_____________，该过程中可加入化学物质_____________促进细胞的融合。

（2）①过程使用的培养基为牛血清-HAT选择培养基，与人工配制的培养基相比，利用血清培养动物细胞的优点是_________________________；HAT选择培养基上的各种细胞中，_____________________________细胞都会死亡，从而筛选出所需的细胞。②过程要经过_______________________两个阶段，并进行多次筛选，最终才能获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

（3）选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞后，还要将该杂交瘤细胞产生的特异性抗体与人的正常肺部细胞混合培养，其目的是筛选出___________________________；应用单克隆抗体检测肺癌的优点在于__________________________________。

Answer 1

【答案】人的肺癌细胞 细胞膜的流动性 聚乙二醇（或PEG） 血清中含有细胞所需的一些人类未知的营养物质 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（或未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞） 克隆化培养和专一抗体检测 能结合肺癌细胞，而不与正常肺部细胞结合的单克隆抗体 特异性强，灵敏度高

【解析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。

（1）为获得人的肺癌细胞免疫过的小鼠，需要将人的肺癌细胞当作抗原注射到小鼠体内。动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，诱导动物细胞融合常用的化学方法是加入化学物质聚乙二醇（或PEG）。

（2）①与人工配制的培养基相比，血清中含有细胞所需的一些人类未知的营养物质；HAT选择培养基中未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（或未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞）细胞都会死亡，从而筛选出所需的细胞。

②过程要经过克隆化培养和专一抗体检测两个阶段，并进行多次筛选，最终才能获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

（3）为筛选出能结合肺癌细胞，而不与正常肺部细胞结合的单克隆抗体，选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞后，还要将该杂交瘤细胞产生的特异性抗体与人的正常肺部细胞混合培养；单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高。