Question

【题目】下图是实验室分离和提取血红蛋白的过程示意图。请回答下列问题：

（1）步骤X表示______________，该步骤的目的是_________________________________。

（2）血红蛋白释放时，应加入蒸馏水和___________，使红细胞破裂，释放出血红蛋白。步骤X、Y都要进行离心，其中离心速度较快的是步骤__________（填X或Y）。

（3）用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子质量较________的蛋白质先被洗脱出来。步骤Z为______________，该过程中色谱柱内不得有气泡存在，其原因是______________________________。

Answer 1

【答案】红细胞的洗涤 去除杂蛋白 40%体积的甲苯 Y 大 凝胶色谱柱的装填 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果

【解析】

血红蛋白的提取和分离流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。可见，X表示红细胞的洗涤，Y表示分离血红蛋白溶液，Z表示凝胶色谱柱的装填，据此答题。

（1）据上分析可知，步骤X表示红细胞的洗涤，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。
（2）血红蛋白释放时，应加入蒸馏水和40%体积的甲苯，使红细胞破裂，释放出血红蛋白。步骤Y要分离分子质量更小的物质，其离心速度要更快。
（3）用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子质量较大的蛋白质先被洗脱出来。步骤Z为凝胶色谱柱的装填。由于气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，所以在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生。