题目内容
【题目】黄曲霉素(AFB1)是由黄曲霉产生的具有极强毒性、致癌性的物质,研究人员利用已免疫的小鼠制备抗AFB1单克隆抗体用于污染样品中AFB1的检测,其制备过程如图所示,回答下列问题。
(1)免疫细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是________________________,该过程中常用___________加速细胞之间的融合。
(2)甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是___________,操作X具体指的是___________,该项操作的目的是____________________。
(3)利用AFB1单克隆抗体用于污染样品中AFB1的检测,具有其他检测方法无法替代的优越性,其原因是单克隆抗体具有__________的优点。
(4)某细菌分泌的某种酶能促进AFB1的分解,研究人员通过改造基因,替换了该酶的一个氨基酸使其活性大大提高,这项技术称为__________。把成功改造的基因重新输回到细菌前要用钙离子处理细菌,用钙离子处理的目的是__________。
【答案】细胞膜具有流动性 灭活的病毒 乙、丙 抗体检测和克隆化培养 获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞 特异性强,灵敏度高,可大量制备 蛋白质工程 使细菌处于感受态
【解析】
单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体。主要运用的细胞工程技术包括①动物细胞培养和②动物细胞融合,原理依次是细胞的增殖、细胞膜具有一定的流动性。
(1)动物细胞能够融合的原理是细胞膜具有一定的流动性,细胞膜通过流动而融合;动物细胞融合过程中常用灭活的病毒促进细胞融合。
(2)甲、乙、丙中,甲含有杂交瘤细胞、同种细胞融合的细胞以及未融合的细胞,而经过选择培养后获得的全部是杂交瘤细胞,因此只含有杂交瘤细胞的是乙和丙;操作X是抗体检测和克隆化培养,其目的是从众多类型的杂交瘤细胞中筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
(3)单克隆抗体用于检测物质具有突出优点,其原因是单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,可大量制备的优点。
(4)替换蛋白质的氨基酸产生自然界中原本不存在的蛋白质,这种技术称为蛋白质工程;把成功改造的基因重新输回到细菌前要用钙离子处理细菌,其目的是使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,(本质上是使用细胞壁的通透性增加),使细菌处于感受态。