Question

【题目】GOLS2基因表达可提高植物细胞内糖类含量，降低植物叶片气孔开度。科研人员将拟南芥GOLS2基因导人并整合到水稻染色体上。请回答下列问题：

（1）从cDNA文库中获得的目的基因___________ （填“含有”或“不含有”）启动子和终止子。通过PCR技术获取GOLS2基因的原理是_________________________，需设计_____种引物。

（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色体上的遗传学物质基础是____________。需将GOLS2基因拼接在运载体上才能成功转化，转化指的是___________________。

（3）基因表达载体的组成除了GOLS2基因外，还必须有___________等；在构建基因表达载体过程中，常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在GOLS2基因上游，双启动子的作用可能是________________，进一步提高细胞内糖类含量。

Answer 1

【答案】不含有 DNA双链复制 2 不同生物DNA分子的基本结构相同 目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程 标记基因、启动子、终止子 保证目的基因的高效转录（表达）

【解析】

cDNA文库只包含该物种部分基因，同一物种的cDNA文库不只1种，真核生物的基因组文库中的基因含有内含子、启动子、终止子等，而从某生物cDNA文库中获取的目的基因不含有启动子、终止子、内含子和非编码区等。一个基因表达载体的组成主要有目的基因、标记基因、启动子和终止子，其中启动子位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的位点，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（1）cDNA基因文库中的DNA是通过逆转录产生的，所以从cDNA文库中获得的目的基因不含有启动子和终止子。通过PCR技术获取GOLS2基因的原理是DNA双链复制，需设计2种引物。

（2）由于不同生物DNA分子的基本结构相同，所以GOLS2基因可以整合到水稻染色体上。基因工程中的转化指的是目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

（3）基因表达载体的组成除了GOLS2基因外，还必须有标记基因、启动子、终止子等；在构建基因表达载体过程中，常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在GOLS2基因上游，双启动子的作用可能是保证目的基因的高效转录（表达），进一步提高细胞内糖类含量。