题目内容

【题目】通常DNA分子复制从一个复制起始点开始,有单向复制和双向复制,如图所示。

放射性越高的3H-胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(3H-脱氧胸苷),在放射自显影技术的图像上,感光还原的银颗粒密度越高。请利用放射性自显影技术、低放射性3H-脱氧胸苷和高放射性3H-脱氧胸苷设计实验以确定大肠杆菌DNA复制的方向,回答下列问题:

1)实验思路:复制开始时,首先用______培养大肠杆菌,一段时间后转移到______中继续培养,用放射自显影技术观察__________

2)实验结果和结论:_______________________________

【答案】含低放射性3H-脱氧胸苷培养基 含有高放射性3H-脱氧胸苷的培养基 复制起点和复制起点两侧银颗粒密度情况 若复制起点处银颗粒密度低,一侧银颗粒密度高,则DNA分子复制为单向复制;若复制起点处银颗粒密度低,复制起点的两侧银颗粒密度高,则DNA分子复制为双向复制。

【解析】

由题意和图示信息准确把握实验目的(确定大肠杆菌DNA复制的方向),从中挖掘出隐含的信息:利用3H-脱氧胸苷使新合成的同一条DNA子链上出现低放射性区段和高放射性区段;利用放射性自显影技术通过观察复制起点及其两侧银颗粒密度情况来判断DNA复制的方向。在此基础上对相关问题进行解答。

(1)依题意可知:该实验的目的是确定大肠杆菌DNA复制的方向。实验原理是:放射性越高的3H-胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(3H-脱氧胸苷)在放射自显影技术的图像上,感光还原的银颗粒密度越高。3H-脱氧胸苷是DNA复制的原料,依据DNA的半保留复制,利用3H标记的低放射性和高放射性的脱氧胸苷使新形成的同一条DNA子链上出现低放射性区段和高放射性区段。利用放射性自显影技术,检测子链上银颗粒密度的高低及其分布来判断DNA复制的方向。综上分析可知该实验思路为:复制开始时,首先用含低放射性3H-脱氧胸苷培养基培养大肠杆菌,一段时间后转移到含有高放射性3H-脱氧胸苷的培养基中继续培养,用放射自显影技术观察复制起点和复制起点两侧银颗粒密度情况。

(2)依据实验思路可知:DNA分子复制为单向复制,则复制起点处银颗粒密度低,远离复制起点的一侧银颗粒密度高。若DNA分子复制为双向复制,则复制起点处银颗粒密度低,复制起点的两侧银颗粒密度高。

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