题目内容

【题目】科学家以质粒为载体,将金属硫蛋白基因导入烟草细胞中,培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列叙述正确的是(

A.质粒作为载体必须具备的条件之一是具有标记基因

B.构建基因表达载体时需要限制酶和DNA聚合酶参与

C.金属硫蛋白基因插入启动子和终止子之间以便大量复制

D.培育转基因烟草时选用的受体细胞一定是受精卵

【答案】A

【解析】

基因工程常用的工具有限制酶、DNA连接酶和载体。

A、质粒作为载体应具备的条件是能在受体细胞中复制并稳定存在;有一个或多个限制酶切割位点,具有标记基因,供重组DNA的选择与鉴定,A项正确;

B、构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶参与,B项错误;

C、金属硫蛋白基因需插入启动子和终止子之间才能转录出相应的mRNA,以便于基因表达,而复制需要有复制原点,C项错误;

D、培育转基因植物时选用的受体细胞可以是受精卵,也可以是体细胞,D项错误。

故选A。

练习册系列答案
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【题目】回答下列(一)、(二)小题:

(一)日常生活中所使用的生物产品,都是由多种酶经过一系列生化反应的产物。例如用糯米酿酒,就是使用微生物在一定条件下,经过一系列酶促反应获得产物的结果。

1)首先,糯米中的淀粉在_______的条件下水解成糖,这一过程是由酒曲中的__________产生 的淀粉酶完成的,于是发酵料变甜。然后,在_______________条件下酵母菌经过糖酵解和乙醇发酵反应,产生乙醇。

2)为获得纯净酵母菌,常常需要用划线分离法获得单菌落。在第二次及以后划线时,总 是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是__________________ 。划线的某个平板培养 后,第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有________________(至少答两点)。

3)可用固定化酵母细胞进行酒精发酵。该操作中需使用海藻酸钠,其作用是____________ 选择固定化酵母细胞而不是固定化酶进行酒精发酵的主要原因是________________

(二)请回答与基因工程有关问题:

1)基因工程基本操作步骤,一般包括:目的基因的获取酶切连接_______筛选检测基因的表达。其中第一步中,可用_______扩增的方式获得大量基因;第二步中为防止DNA的自连,我们常使用___________的方式进行酶切;第三步连接反应时为提高连接效率,需注意外源目的基因与质粒比例;第四步将重组DNA 导入受体细胞前,常使用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为____________细胞;第五步筛选含有目的基因的受体细胞,常会 借助载体上____________的表达;第六步检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质,利用的 技术是________

2)包涵体,是外源基因在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒,无生物学活性。包涵体形成与胞质内蛋白质生成速率有关,短时间内新生成的多肽浓度过高,无充足的时间进行折叠,易形成包涵体,另外,宿主菌的培养条件,如培养基成分、pH值、离子强度等因素也与此有关。对此我们可以采取的措施是___________,诱导培养时对摇床进行 处理。在下游工艺纯化蛋白时,细菌裂解液的澄清工艺很重要,因为裂解液中颗粒物进入层析柱的柱床中填料间隙,会导致层析柱使用时反压升高,从而导致流速___________,影响整个工艺效率。

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