Question

【题目】幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，其不良预后是胃癌。据研究发现，目前我国有超过50%人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌，环境氧要求5%～8%，在大气或绝对厌氧环境下均能生长，Hp中某种酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。

在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察。请回答：

（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有________，所以它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现____色环带。

（2）步骤X的操作如下图所示：

①微生物接种的方法很多，但都要注意____________；上图所示方法为_____________。

②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是_____________。

（3）在培养时，需将培养皿________并放在恒温培养箱中。

Answer 1

【答案】脲酶 红 防止杂菌的污染 稀释涂布平板法 使微生物和无菌水混合均匀 倒置

【解析】

根据题意，Hp中某种酶催化尿素水解形成“氨云”，故Hp能产生脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH变化的方法来判断尿素是否被分解，也可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，会使酚红指示剂变红。

（1）根据题意，“Hp中某种酶催化尿素水解形成氨云”，即Hp含有脲酶，能以尿素作为氮源，因此在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂；若有Hp，则脲酶能将尿素分解成氨，而氨会使培养基碱性增强，即pH升高，菌落周围会出现红色环带。

（2）①微生物接种的方法很多，但都要注意防止杂菌的污染；接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，图示所示为稀释涂布平板法。

②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是使微生物和无菌水混合均匀。

（3）在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中。