题目内容

【题目】某种植物甲能抗真菌病,其抗性是由细胞内的几丁质酶基因A决定的。利用基因程将甲的A基因转移到乙植物体内,可提高乙抗真菌病的能力。请回答下列问题:

1)在获取目的基因时,可从甲的细胞中提取几丁质酶的mRNA,然后合成cDNA。利用mRNA合成cDNA的过程称作________;与甲细胞中的A基因相比,利用mRNA合成的cDNA中不具有________等核苷酸序列。

2)在利用农杆菌转化法时,需将目的基因插入到Ti质粒的T—DNA中,原因是________:将目的基因插入到T—DNA中用到的工具酶有________

3)在获得转基因植物乙后,可利用基因探针来检测乙的细胞中是否存在A基因的转录产物。基因探针指的是________

4)实验发现,将携带了A基因的乙植株体细胞进行离体培养,会获得具有抗真菌病能力的完整植株。上述离体培养过程称为________。植物细胞发育成完整植株的潜能称作________,其原因是________

【答案】逆转录 启动子、内含子、终止子 T—DNA可转移到植物细胞中,并能整合到染色体单链DNA 限制酶和DNA连接酶 用放射性同位素标记的含A基因的单链DNA片段 (植物)组织培养 细胞的全能性 分化后的植物细胞中具有形成完整植株的全部基因

【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取; ②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与鉴定。

1)根据题意分析,上述人工合成cDNA的过程是以RNA为模板合成DNA的过程,为逆转录过程;与A基因相比,人工合成的cDNA中不含启动子、终止子和内含子。

2)农杆菌细胞中的Ti质粒上的T-DNA(可转移DNA)能进入植物细胞并整合到植物细胞染色体DNA上,因此在利用农杆菌转化法转基因时,需将目的基因插入到质粒的T-DNA中,基因表达载体的构建常需要使用限制酶和DNA连接酶。

3)为了检测乙的细胞中是否存在A基因的转录产物,可使用放射性标记的含A基因的单链DNA片段做基因探针。

4)将携带了A基因的乙植株体细胞离体培养成完整的植株的过程为植物组织培养,利用了植物细胞的全能性,依据的原理的是分化后的植物细胞中具有形成完整植株的全部基因。

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