Question

【题目】(1)要统计泳池水源中的活菌总数，应该采用的方法是_______________________。工作者将三个接种了等量水源水的培养基置于37℃的恒温箱中培养。24小时后观察到三个平板上的菌落数目为21、256、215，请分析结果出现的可能原因_____________________，并提供解决方案：______________________________________________________。

(2)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“-”表示无。

据表判断，培养基甲_______（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是_____________________________________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于鉴别纤维素分解菌，原因是_______________________________________。

(3)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括______________、_______________和果胶酯酶等，在果汁加工中，果胶酶可以起到_________________________等作用。

Answer 1

【答案】稀释涂布平板法 涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板（或者后两个平板被污染；或者操作失误） 重做实验 不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR—纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 分解果胶，瓦解植物细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易 果胶被分解成可溶性的半乳糖醛酸，使果汁变澄清

【解析】

1、选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2、分解纤维素的微生物的分离的实验原理：

①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

3、果胶物质主要存在于植物初生壁和细胞中间，果胶物质是细胞壁的基质多糖；果胶本质上是一种线形的多糖聚合物，果胶包括两种酸性多糖（聚半乳糖醛酸、聚鼠李半乳糖醛酸）和三种中性多糖（阿拉伯聚糖、半乳聚糖、阿拉伯半乳聚糖）；果胶酶本质上是聚半乳糖醛酸水解酶，是一种蛋白质酶类物质，酶发挥作用需要适宜的条件，如pH，温度等等，最适条件下，酶的活性最高，催化底物分解作用最快。

（1）要统计水源中的活菌总数，应该采用稀释涂布平板法，对培养基上的菌落进行计数。根据题干信息可知，第一个平板菌落数偏低，可能是涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板；后两个平板菌落数偏高，因此也可能是后两个平板被污染，因此最好重复实验。

（2）培养基甲为液体培养基，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，因为纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基。培养基乙没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌，因此也不能用于分离和鉴别纤维素分解菌。

（3）果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，常用于果汁的生产，由于果胶物质主要存在于植物初生壁和细胞中间，因此在果汁加工中，果胶酶可以起到分解果胶，瓦解植物细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，同时果胶被分解成可溶性的半乳糖醛酸，还可以使果汁变澄清。