题目内容
【题目】人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。
（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取___________合成cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。
（2）PCR技术的前提是需要引物，图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向_____________。
（3）基因工程中的核心步骤是____________________，该环节可使目的基因在受体细胞中___________________________________________作用。启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是____。
A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
（4）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，作用是____________。
【答案】总RNA（或mRNA） 
基因表达载体的构建 稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥 B 吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）为获取HSA基因，可通过反转录法，首先需采集人的血液，提取总RNA合成总cDNA。然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。
（2）由于DNA两条链是反向平行的，复制时也是方向相反，如图中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，则另一条引物位于另一条链的相反一端，如图所示
（3）基因工程中的核心步骤是基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。启动子通常具有物种及组织特异性，故若构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是水稻胚乳细胞启动子，故选B。
（4）由于酚类物质能够吸引农杆菌移向受体细胞，并将农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上，所以利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需要添加酚类物质。
