题目内容

【题目】配制培养基时可根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或除去某些营养物质抑制其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物,这种培养基叫做选择培养基。

根据有关内容回答以下问题:

1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、____________________

2)某同学在做微生物实验时,不小心把大肠杆菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的大肠杆菌和酵母菌的实验步骤并回答有关问题:

主要步骤:

①制备两种培养基:一种_____________的培养基,另一种加青霉素的培养基。分别分成两份,依次标上备用。培养基应采用_____________法灭菌。

②分别向AB培养基中接种_______________________

③接种后,放在恒温箱中培养3~4天。试说明观察到的培养结果:_______________________

④分别从AB培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到培养基中。

⑤接种后,把培养基放入恒温箱中培养3~4天。

第④⑤两个步骤的目的是______________________

【答案】灭菌 倒平板 加入伊红美蓝 高压蒸汽灭菌 混合菌 伊红美蓝培养基上的黑色菌落是大肠杆菌,加青霉素的培养基上生长的菌落是酵母菌 获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌

【解析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板.培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌,接种的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板法

1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板;

2)①青霉素不影响酵母菌的生长繁殖,而会抑制大肠杆菌的生长繁殖,大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应,使菌落呈黑色,所以一种培养基加入伊红美蓝,一种培养基加入加青霉素,采用高压蒸汽灭菌法灭菌;

②分别向AB培养基中接种混合菌;

③接种后培养的结果,伊红美蓝培养基上的黑色菌落是大肠杆菌,加青霉素的培养基上生长的菌落是酵母菌;

⑤分别从AB培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到培养基中培养,目的是获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌。

练习册系列答案
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【题目】凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶,直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制,培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。用紫外线照射芽孢杆菌,分离、培养,并检测各菌株所产生的凝乳酶活力,操作过程如图所示。请分析回答:

1)图所示紫外线照射的原理是________,接种用的平板培养基________(是、不是)选择培养基。

2)在一定温度下(35℃),一定时间内(通常为40分钟),凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U),凝乳酶活力检测结果如图2所示。

①据图所示,酶催化能力最强的是________组。

A2A5组酶活力单位与A0组芽孢杆菌相同,两位同学对此做出了推测。

同学甲:A2A5组芽孢杆菌未发生基因突变,因为基因突变具有________的特点。

同学乙:A2A5组芽孢杆菌发生基因突变,但凝乳酶蛋白未改变,其依据的理由是________________。为了验证上述2位同学的假设,可采用________________技术检测凝乳酶基因是否发生了突变。

3)从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。

①从牛胃细胞中提取________________,再反转录形成cDNA。以此cDNA为模板PCR扩增目的基因,有时需要在引物的起始端设计________(限制酶、DNA连接酶、RNA聚合酶)识别序列,以便构建重组DNA分子。

②构建重组DNA分子(如图所示)最好选用________________限制酶(填酶的名称),理由是________________

③工业化生产过程中,最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶,现多采用重组毛霉生产,毛霉作为受体细胞的优势是___________________________________________________________________

④研究发现,如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸,其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶,所需步骤依次有________

a.蛋白质的结构设计

b.蛋白质的结构和功能分析

c.蛋白质结构的定向改造

d.凝乳酶基因的定向改造

e.将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞

f.将定向改造的凝乳酶导入受体细胞

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