题目内容
（7分）2008年诺贝尔化学奖授予了下村脩、马丁·沙尔菲、钱永健三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家，他们代表了绿色荧光蛋白研究上的三个里程碑。请结合所学知识分析回答：
材料一 下村脩1962年在普林斯顿大学做研究的时候从一种水母身上分离出绿色荧光蛋白（GFP）。当时知道在蓝光或紫外光的激发下，它会发出绿色荧光。
材料二 科学家1992年克隆出了GFP基因，随后马丁·沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功。之后，会发光的鼠、猪、猫、兔、蝌蚪、鱼也相继问世。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程：
材料三 钱永健通过改造GFP基因，相继制造出了蓝色（BFP）和黄色（YFP）的荧光蛋白。
（1）为了提高实验成功率，需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入__________种引物和__________。
（2）将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是__________。
A. 追踪目的基因在细胞内的复制过程
B. 追踪目的基因插入到染色体上的位置
C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D. 追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
（3）材料二中，过程①构建的基因表达载体的组成必需含有启动子、终止子、复制原点、_____________、_________________。
（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因__________。
（5）材料三中，钱永健制造出蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白，这种现代生物工程技术称为__________。
（7分）（1）2 耐热的DNA聚合酶（Taq酶） （2）C （3）CFP（目的）基因 标记基因 （4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达 蛋白质工程
【解析】PCR技术和细胞内DNA复制相比，通常要加入耐高温的DNA聚合酶和两种引物片段，绿色荧光蛋白通常跟踪目的基因翻译的蛋白质，了解蛋白质在细胞内分布情况。基因表达载体的构建需启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点。目的基因导入动物细胞通常导入受精卵细胞，因为受精卵细胞具有发育的全能性，可以发育成一个个体，目的基因插入导致受精卵死亡，最可能原因是破坏了影响受精卵生命活动的某些基因，使其不能正常表达，
钱永健制造出蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白，这种现代生物工程技术第二代基因工程技术的蛋白质工程。
期末1卷素质教育评估卷系列答案
国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是否可以连接起来， 理由是： 。