Question

【题目】2020年新型冠状病毒（COVID--19）在全球大爆发，起人体患病毒性肺炎，该病毒为单链RNA病毒。请回答下列问题：

（1）研究表明，RNA酶广泛存在而稳定，RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA的降解。病毒核酸检测是新冠肺炎诊治的关键一步，常采用核酸检测试剂盒（RT-PCR技术——逆转录荧光PCR技术）进行检测。RT-PCR技术首先经___________酶的作用，以病毒RNA为模板合成___________，再以其为模板，扩增合成目的片段。不直接用病毒RNA进行核酸检测，而采用RT-PCR技术的原因是___________。

（2）得到足够量的逆转录病毒DNA之后，可用放射性同位素将其标记作为探针，利用__________技术，按照___________原理对待测人员进行核酸检测。如果显示出___________，即为阳性。

（3）PCR技术中使用的Taq酶是来自于温泉的一种嗜热菌，该菌能在高温环境中生长的特殊本领是由细胞内___________直接决定的。

Answer 1

【答案】逆转录 cDNA 通过扩增反应将样本中微量的病毒信息加以放大 DNA分子杂交 碱基互补配对 杂交带 Taq酶特定的空间结构

【解析】

RT -PCR即逆转录-聚合酶链反应。原理是:提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。

（1）由以上分析可知：RT-PCR技术首先经逆转录酶的作用，以病毒RNA为模板合成cDNA；再以其为模板，扩增合成目的片段（双链DNA）；因样品中病毒RNA含量较少，故不直接用病毒RNA进行核酸检测，而采用RT-PCR技术可通过扩增反应将样本中微量的病毒信息加以放大，故常采用PCR技术。

（2）用放射性同位素标记的探针（能与病毒的互补配对的序列）对疑似患者进行核酸检测，其检测方法采用了（DNA）分子杂交技术；该技术的原理为碱基互补配对；若探针能与待测人员的核酸出现杂交带，则证明该患者为阳性。

（3）Taq酶的化学本质为蛋白质，其（功能）特点是由其特定的空间结构直接决定的。